可干擾癌細胞分裂過程，用於治療多種癌症，如乳癌、急性淋巴性白血病、胃癌及膀胱癌等。氨甲喋呤可帶來多種副作用，包括黏膜發炎及血小板減少，孕婦使用更可致胎兒畸形。女性服用期間及完成療程後八周內必須避孕。正哺乳的婦女及肝腎功能不全的人亦不宜使用。